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需要目标基因的上游存在一个特定的短的碱基序列,我们称之为PAM序列。如果实际操作中,目标基因上游到处都没有PAM序列,那么即使小剪刀找到了正确位置,也无法咔嚓一刀剪下去。
最后,小剪刀也是有脾气的。有时,它的GPS没有找到完全匹配的DNA片段,但小剪刀就是想剪。于是它便会随便找一段类似的DNA片段,咔嚓一下剪下去。然后转身就走,深藏功与名。
以上三种情况,在专业术语里,叫做“脱靶”。
小剪刀很好用,但奈何小剪刀经常不做人。因此,这项技术的实际效果,目前来说并不理想。